座機：028-85221603/13679068714
郵箱：cdmore@163.com
HPLC靈敏度不夠主要原因及解決辦法
1、樣品量不足，解決辦法為增加樣品量
2、樣品未從柱子中流出。可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子
3、樣品與檢測器不匹配。根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器
4、檢測器衰減太多。調整衰減即可。
5、檢測器時間常數太大。解決辦法為降低時間參數
6、檢測器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。
7、檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。
8、流動相流量不合適。調整流速即可。
為什么HPLC柱柱壓過高
柱壓過高是HPLC柱用戶***常碰到的問題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問題，您可按下面步驟檢查問題的起因。
1、拆去保護預柱，看柱壓是否還高，否則是保護柱的問題，若柱壓仍高，再檢查（在安裝了保護預柱的情況下）；
2、把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降，若壓力仍高則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查；
3、將柱子的進出口反過來接在儀器上，用10倍柱體積的流動相沖洗柱子，（此時不要連接檢測器，以防固體顆粒進入流動池）。這時，如果柱壓仍不下降，再檢查；
4、更換柱子入口篩板，若柱壓下降，說明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質，正是這些雜質將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高，請與廠商聯系。
液相色譜中峰出現拖尾或雙峰的原因
1、篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。
2、存在干擾峰，解決辦法為使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子
如何解決保留時間發生漂移或急速變化漂移現象
1、溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定
2、流動相發生變化，解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等
3、柱子未平衡好，需對柱子進行更長時間的平衡
快速變化現象
1、流速發生變化，解決辦法是重新設定流速，使之保持穩定
2、泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。
3、流動相不合適，解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合。
HPLC儀器問題
1、我的HPLC泵壓明顯的偏高，請問可能的原因？
答：流速設定過高；流動相或進樣中有機械雜質，造成保護柱、柱前篩板或在線過濾器阻塞；流動相粘度過大；柱溫過低；緩沖鹽結晶；壓力傳感器故障。
2、基線不穩，上下波動或漂移的原因是什么，如何解決？
答：a.流動相有溶解氣體；用超聲波脫氣15-30分鐘或用充氦氣脫氣
b.單向閥堵塞；取下單向閥，用超聲波在純水中超20分鐘左右，去處堵塞物
c.泵密封損壞，造成壓力波動；更換泵密封
d.系統存在漏液點；確定漏液位置并維修
f.柱后產生氣泡；流通池出液口加負壓調整器
g.檢測器沒有設定在******吸收波長處；將波長調整至******吸收波長處
h.柱平衡慢，特別是流動相發生變化時；用中等強度的溶劑進行沖洗，更改流動相時，在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。
3、接頭處為何經常漏液，如何處理？
答：接頭沒有擰緊；擰松后再緊，手緊接頭以手勁為限，不要使用工具，不銹鋼接頭先用手擰緊，再用專用扳手緊1/4-1/2圈，注意接頭中的管路一定要通到底，否則會留下死體積。接頭被污染或磨損；建議更換接頭。接頭不匹配，建議使用同一品牌的配件。
4、進樣閥漏液是如何造成的？
答：a.轉子密封損壞；更換轉子密封
b.定量環阻塞；清洗或更換定量環
c.進樣口密封松動；調整松緊度
d.進樣針頭尺寸不合適，一般是過短；使用恰當的進樣針（注意針頭形狀）
e.廢液管中產生虹吸；清空廢液管
譜圖問題
1、問：造成峰拖尾的原因是什么，如何消除？
答：a.篩板阻塞；反沖色譜柱、更換進口篩板
b.色譜柱塌陷；填充色譜柱
c.有干擾物質的存在；使用更長的色譜柱、改變流動相或更換色譜柱
e.流動相PH值不合適；調整PH值，對于堿性化合物，低PH值更有利于得到對稱峰
f.樣品與填料表面的溶化點發生反應；加入離子對試劑或堿性揮發性修飾劑或更改色譜柱
2、問：造成峰分叉的原因是什么，如何消除？
答：保護柱或分析柱污染；取下保護柱再進行分析。如果必要更換保護柱。如果分析柱阻塞，拆下來清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強保留物質污染，運用適當的再生措施。如果問題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。樣品溶劑不溶于流動相；改變樣品溶劑，如果可能采取流動相作為樣品溶劑。
3、問：K值增加時，拖尾更嚴重，這是為什么？
答：反相模式，二級保留效應；a.加入三乙胺（或堿性樣品）b.加入乙酸（或酸性樣品） c.加入鹽或緩沖劑（或離子化樣品）
d.更換一支柱子
4、問：保留時間的波動有幾種可能的原因？
答：溫控不當；調節好柱溫。流動相組分變化；防止流動相蒸發、反應等，做梯度時尤其要注意流動相混合的均勻。色譜柱沒有平衡；在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱。
更多技術支持,歡迎搜索成都摩爾科學儀器有限公司
內容編輯